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溫度梯度凝膠電泳

溫度梯度膠體電泳(temperature gradient gel electrophoresis, TGGE)是電泳技術的一種,通過物質在不同溫度下性質的區別進行分離。

TGGE是一種有效的分離DNARNA或者蛋白的手段。它利用了不同分子在溫度改變下構象的差別進行分離。另外一種類似的技術是變性梯度膠體電泳(denaturing gradient gel electrophoresis, DGGE),則是利用不同分子在不同濃度的變性劑的作用下失活實現的。

DGGE的原理

具有相似長度的DNA用普通的凝膠電泳無法進行分離,但利用DGGE可以分離長度只有200~700bp的DNA片段,若長度超過700bp會造成檢定效率的下降,但也有報導持相反意見,認為片段長度的影響不大。DGGE凝膠中的變性劑濃度在上樣處最低,向後逐漸增高。電泳過程中,起初雙鏈DNA以直線形狀向正極移動。隨著變性劑(如甲酰胺尿素)濃度的增加,DNA中具有低G+C含量的序列的部分被打開,而高G+C含量的部分仍保持雙鏈。這樣,DNA分子形成端部的叉狀或中間的環形(即DNA部分熔化),便不能繼續向前移動而形成條帶,如此便能將具有相似長度而序列有差異的DNA分子分離開。

TGGE的原理

TGGE的原理和DGGE相似,但用溫度梯度代替了變性梯度。

應用

梯度凝膠電泳的主要應用主要在兩個領域: 1)突變的檢定(mutation analysis) 利用DGGE和TGGE能夠發現和分離一些微小的突變,因爲突變有時候能明顯改變分子變性所需的變性劑濃度/變性溫度。 2)複雜細菌樣品的多樣性分析(diversity analysis of complex bacterial samples)

此兩種應用的主要區別在於檢定片段數目上的差異。

溫度梯度凝膠電泳, 溫度梯度膠體電泳, temperature, gradient, electrophoresis, tgge, 是電泳技術的一種, 通過物質在不同溫度下性質的區別進行分離, tgge是一種有效的分離dna, rna或者蛋白的手段, 它利用了不同分子在溫度改變下構象的差別進行分離, 另外一種類似的技術是變性梯度膠體電泳, denaturing, gradient, electrophoresis, dgge, 則是利用不同分子在不同濃度的變性劑的作用下失活實現的, dgge的原理, 编辑具有相似長. 溫度梯度膠體電泳 temperature gradient gel electrophoresis TGGE 是電泳技術的一種 通過物質在不同溫度下性質的區別進行分離 TGGE是一種有效的分離DNA RNA或者蛋白的手段 它利用了不同分子在溫度改變下構象的差別進行分離 另外一種類似的技術是變性梯度膠體電泳 denaturing gradient gel electrophoresis DGGE 則是利用不同分子在不同濃度的變性劑的作用下失活實現的 DGGE的原理 编辑具有相似長度的DNA用普通的凝膠電泳無法進行分離 但利用DGGE可以分離長度只有200 700bp的DNA片段 若長度超過700bp會造成檢定效率的下降 但也有報導持相反意見 認為片段長度的影響不大 DGGE凝膠中的變性劑濃度在上樣處最低 向後逐漸增高 電泳過程中 起初雙鏈DNA以直線形狀向正極移動 隨著變性劑 如甲酰胺或尿素 濃度的增加 DNA中具有低G C含量的序列的部分被打開 而高G C含量的部分仍保持雙鏈 這樣 DNA分子形成端部的叉狀或中間的環形 即DNA部分熔化 便不能繼續向前移動而形成條帶 如此便能將具有相似長度而序列有差異的DNA分子分離開 TGGE的原理 编辑TGGE的原理和DGGE相似 但用溫度梯度代替了變性梯度 應用 编辑梯度凝膠電泳的主要應用主要在兩個領域 1 突變的檢定 mutation analysis 利用DGGE和TGGE能夠發現和分離一些微小的突變 因爲突變有時候能明顯改變分子變性所需的變性劑濃度 變性溫度 2 複雜細菌樣品的多樣性分析 diversity analysis of complex bacterial samples 此兩種應用的主要區別在於檢定片段數目上的差異 这是一篇與生物学相關的小作品 你可以通过编辑或修订扩充其内容 查论编 取自 https zh wikipedia org w index php title 溫度梯度凝膠電泳 amp oldid 36602223, 维基百科,wiki,书籍,书籍,图书馆,

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