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單鏈構象多態性

單鏈構象多態性(英語:single-strand conformation polymorphism,简称为SSCP)是一種分離核酸的技術,可以分離相同長度但序列不同的核酸(性質類似於DGGETGGE,但方法不同)。

原理 编辑

在非變性條件下,單鏈核酸分子由於分子内序列互補,可形成二級三級結構,即不同構象。在凝膠電泳中,未變性的單鏈核酸分子通過如下性質分離:

  • 鏈長
  • 分子间相互作用
  • 一級結構:某些位點的一個核苷酸發生改變也可能影響整個構象。

實驗步驟 编辑

  1. 利用PCR從提取出的DNA中擴增16S rRNA基因。
  2. 利用λ-外切核酸酶消化掉一條鏈(其中一個PCR引物被磷酸化,這條鏈將被去除)。
  3. 非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)。

應用 编辑

  • 單鏈構象多態性可用於預篩選克隆文庫。
  • 可對其中的某一個條帶進行測序,並與數據庫中已知序列比對

參見 编辑

單鏈構象多態性, 英語, single, strand, conformation, polymorphism, 简称为sscp, 是一種分離核酸的技術, 可以分離相同長度但序列不同的核酸, 性質類似於dgge和tgge, 但方法不同, 目录, 原理, 實驗步驟, 應用, 參見原理, 编辑在非變性條件下, 單鏈核酸分子由於分子内序列互補, 可形成二級和三級結構, 即不同構象, 在凝膠電泳中, 未變性的單鏈核酸分子通過如下性質分離, 鏈長, 分子间相互作用, 一級結構, 某些位點的一個核苷酸發生改變也可能影響整個構象. 單鏈構象多態性 英語 single strand conformation polymorphism 简称为SSCP 是一種分離核酸的技術 可以分離相同長度但序列不同的核酸 性質類似於DGGE和TGGE 但方法不同 目录 1 原理 2 實驗步驟 3 應用 4 參見原理 编辑在非變性條件下 單鏈核酸分子由於分子内序列互補 可形成二級和三級結構 即不同構象 在凝膠電泳中 未變性的單鏈核酸分子通過如下性質分離 鏈長 分子间相互作用 一級結構 某些位點的一個核苷酸發生改變也可能影響整個構象 實驗步驟 编辑利用PCR從提取出的DNA中擴增16S rRNA基因 利用l 外切核酸酶消化掉一條鏈 其中一個PCR引物被磷酸化 這條鏈將被去除 非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳 PAGE 應用 编辑單鏈構象多態性可用於預篩選克隆文庫 可對其中的某一個條帶進行測序 並與數據庫中已知序列比對 參見 编辑分子生態學 取自 https zh wikipedia org w index php title 單鏈構象多態性 amp oldid 41578033, 维基百科,wiki,书籍,书籍,图书馆,

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