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DNA提取

DNA提取是從細胞等樣本中取得DNA的常規方法。

DNA提取概述 编辑

DNA提取分爲三個基本步驟,每個步驟的具體方法可根據樣品種類、影響提取的物質以及後續步驟的不同而有區別。

  1. 利用研磨或者超聲波破碎细胞得到沉澱,或者氯仿抽提,以除掉細胞内的蛋白,如與DNA結合的組蛋白
  2. 將DNA在冷乙醇異丙醇中沉澱,因爲DNA在醇中不可溶而黏在一起,這一步也能除掉鹽分。

另外,目前也有利用吸附過柱的方法提取DNA的商業化試劑盒。123

DNA的檢測 编辑

二苯胺(DPA)指示劑能夠證明DNA的存在。在酸中加熱後,含有脫氧糖的DNA水解,2-脫氧核糖轉變為ω-羥基菊芋糖醛(ω-hydroxylevulinyl aldehyde),與二苯胺反應,產生藍色的化合物。DNA濃度可以利用分光光度計通過測量溶液在600nm的吸光度來計算。

測量DNA純度的方法是測量DNA溶液在260和280nm的吸光度。DNA吸收260nm處的紫外光,而蛋白質吸收280nm處的。一個較純的DNA樣品應該基本不含蛋白質,因此260/280的吸光度比值應該較高。

DNA也可以通過限制性核酸内切酶切開後跑膠,與已知濃度的DNA分子量標準(marker或者ladder)對照來測定濃度。

DNA的使用 编辑

提取得到的基因組DNA包含細胞核和粒線體DNA(真核生物)以及葉綠體DNA(植物藻類)。這些DNA可用於法醫學鑑定、診斷和系統發育研究,以及用於進一步的聚合酶鏈式反應(PCR)以獲得DNA中的特殊信息。

純化得到的DNA也可用於研究DNA結構和化學性質,檢驗DNA-蛋白質相互作用,進行南方墨點法雜交,複製測序

參見 编辑

dna提取, 是從細胞等樣本中取得dna的常規方法, 目录, 概述, dna的檢測, dna的使用, 參見概述, 编辑分爲三個基本步驟, 每個步驟的具體方法可根據樣品種類, 影響提取的物質以及後續步驟的不同而有區別, 利用研磨或者超聲波破碎细胞得到沉澱, 或者酚或氯仿抽提, 以除掉細胞内的蛋白, 如與dna結合的組蛋白, 將dna在冷乙醇或異丙醇中沉澱, 因爲dna在醇中不可溶而黏在一起, 這一步也能除掉鹽分, 另外, 目前也有利用吸附過柱的方法提取dna的商業化試劑盒, 123dna的檢測, 编辑二苯胺, 指示劑. DNA提取是從細胞等樣本中取得DNA的常規方法 目录 1 DNA提取概述 2 DNA的檢測 3 DNA的使用 4 參見DNA提取概述 编辑DNA提取分爲三個基本步驟 每個步驟的具體方法可根據樣品種類 影響提取的物質以及後續步驟的不同而有區別 利用研磨或者超聲波破碎细胞得到沉澱 或者酚或氯仿抽提 以除掉細胞内的蛋白 如與DNA結合的組蛋白 將DNA在冷乙醇或異丙醇中沉澱 因爲DNA在醇中不可溶而黏在一起 這一步也能除掉鹽分 另外 目前也有利用吸附過柱的方法提取DNA的商業化試劑盒 123DNA的檢測 编辑二苯胺 DPA 指示劑能夠證明DNA的存在 在酸中加熱後 含有脫氧糖的DNA水解 2 脫氧核糖轉變為w 羥基菊芋糖醛 w hydroxylevulinyl aldehyde 與二苯胺反應 產生藍色的化合物 DNA濃度可以利用分光光度計通過測量溶液在600nm的吸光度來計算 測量DNA純度的方法是測量DNA溶液在260和280nm的吸光度 DNA吸收260nm處的紫外光 而蛋白質吸收280nm處的 一個較純的DNA樣品應該基本不含蛋白質 因此260 280的吸光度比值應該較高 DNA也可以通過限制性核酸内切酶切開後跑膠 與已知濃度的DNA分子量標準 marker或者ladder 對照來測定濃度 DNA的使用 编辑提取得到的基因組DNA包含細胞核和粒線體DNA 真核生物 以及葉綠體DNA 植物和藻類 這些DNA可用於法醫學鑑定 診斷和系統發育研究 以及用於進一步的聚合酶鏈式反應 PCR 以獲得DNA中的特殊信息 純化得到的DNA也可用於研究DNA結構和化學性質 檢驗DNA 蛋白質相互作用 進行南方墨點法雜交 複製和測序 參見 编辑聚合酶鏈式反應 DNA指紋 取自 https zh wikipedia org w index php title DNA提取 amp oldid 77819931, 维基百科,wiki,书籍,书籍,图书馆,

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