凯氏定氮法（英語：Kjeldahl method，全称凯耶达尔定氮法，简称凯氮法）是分析化学中一种常用的确定有机化合物中氮含量的检测方法。这种方法是由凯耶达尔在1883年发明的。[1]
装置图 方法 编辑
将有机化合物与硫酸共热使其中的氮转化为硫酸铵。在这一步中，经常会向混合物中加入硫酸钾来提高中间产物的沸点（从337℃到373℃）。样本的分解过程的终点很好判断，因为这时混合物会变得无色且透明（开始时很暗）。
在得到的溶液中加入少量氢氧化钠，然后蒸馏。这一步会将铵盐转化成氨。而总氨量（由样本的含氮量直接决定）会由反滴定法确定：冷凝管的末端会浸在硼酸溶液中。氨会和酸反应，而过量的酸则会在甲基橙的指示下用碳酸钠滴定。滴定所得的结果乘以特定的转换因子就可以得到结果。
通过凯氏定氮法测得的含氮量一般被称作总凯氮量。总凯氮量有时并不能真正地反映样本中的蛋白质含量，因为所测定的部分含氮量可能不是由蛋白质转化来的。
- 样本的分解： 蛋白质 + H2SO4 → (NH4)2SO4(aq) + CO2(g) + SO2(g) + H2O(g)
- 铵盐的分解： (NH4)2SO4(aq) + 2NaOH → Na2SO4(aq) + 2H2O(l) + 2NH3(g)
- 氨的固定： H3BO4 + NH3 → NH4H2BO4
- 反滴定： NH4H2BO4 + HCL → NH4CL + H2BO4+H+
如今，凯氏定氮法已经可以自动化进行，一些催化剂（如氧化汞或硫酸铜）也被使用来提高反应速率。
转换因子 编辑
转换因子是通过凯氏定氮法测得的氮换算为蛋白质的系数。理想状态下的蛋白质中的氮含量约为16%，所以测量值乘以6.25即为蛋白质量。下表为总结出的转换因子数值。
| 样本 | 转换因子 |
|---|
| 乳制品 | 6.38 |
| 面粉 | 5.70 |
| 玉米、高粱 | 6.24 |
| 花生 | 5.46 |
| 大米 | 5.95 |
| 大豆 | 5.71 |
| 肉 | 6.25 |
| 大麦、小米、燕麦、裸麦 | 5.83 |
| 芝麻、向日葵 | 5.30 |
应用 编辑
凯氏定氮法的普遍适用性、精确性和可重复性已经得到了国际的广泛认可。它已经被确定为检测食品中蛋白质含量的标准方法。但是，这种方法并不能给出真实的蛋白质含量，因为所测定的氮可能不仅仅是由蛋白质转化来的。这可以从2007年美国宠物食品污染事件和2008年中国毒奶粉事件等食品安全事件中被体现：三聚氰胺，一种含氮量较高的物质，被添加到了食品中以伪造较高的含氮量。另外，由于不同的氨基酸序列，这种方法也需要许多不同的校正因子。而且，凯氏定氮法还需要使用浓硫酸和较长时间的加热（一般来讲，大于1小时）。这也造成了在粗略测量蛋白质含量时，杜马法有时更方便些。[2]
参见 编辑
参考资料 编辑
- ^ Practical Organic Chemistry 〔有機化學實驗〕－Julius B. Cohen
- ^ Dr. D. Julian McClements. Analysis of Proteins. University of Massachusetts. [2007-04-27]. （原始内容于2007-04-26）.
外部链接 编辑
- 凯氏定氮法仪器信息1（页面存档备份，存于互联网档案馆）
- 凯氏定氮法仪器信息2
凯氏定氮法, 英語, kjeldahl, method, 全称凯耶达尔定氮法, 简称凯氮法, 是分析化学中一种常用的确定有机化合物中氮含量的检测方法, 这种方法是由凯耶达尔在1883年发明的, 装置图, 目录, 方法, 转换因子, 应用, 参见, 参考资料, 外部链接方法, 编辑将有机化合物与硫酸共热使其中的氮转化为硫酸铵, 在这一步中, 经常会向混合物中加入硫酸钾来提高中间产物的沸点, 从337, 到373, 样本的分解过程的终点很好判断, 因为这时混合物会变得无色且透明, 开始时很暗, 在得到的溶液中加入少量氢. 凯氏定氮法 英語 Kjeldahl method 全称凯耶达尔定氮法 简称凯氮法 是分析化学中一种常用的确定有机化合物中氮含量的检测方法 这种方法是由凯耶达尔在1883年发明的 1 装置图 目录 1 方法 2 转换因子 3 应用 4 参见 5 参考资料 6 外部链接方法 编辑将有机化合物与硫酸共热使其中的氮转化为硫酸铵 在这一步中 经常会向混合物中加入硫酸钾来提高中间产物的沸点 从337 到373 样本的分解过程的终点很好判断 因为这时混合物会变得无色且透明 开始时很暗 在得到的溶液中加入少量氢氧化钠 然后蒸馏 这一步会将铵盐转化成氨 而总氨量 由样本的含氮量直接决定 会由反滴定法确定 冷凝管的末端会浸在硼酸溶液中 氨会和酸反应 而过量的酸则会在甲基橙的指示下用碳酸钠滴定 滴定所得的结果乘以特定的转换因子就可以得到结果 通过凯氏定氮法测得的含氮量一般被称作总凯氮量 总凯氮量有时并不能真正地反映样本中的蛋白质含量 因为所测定的部分含氮量可能不是由蛋白质转化来的 样本的分解 蛋白质 H2SO4 NH4 2SO4 aq CO2 g SO2 g H2O g 铵盐的分解 NH4 2SO4 aq 2NaOH Na2SO4 aq 2H2O l 2NH3 g 氨的固定 H3BO4 NH3 NH4H2BO4反滴定 NH4H2BO4 HCL NH4CL H2BO4 H 如今 凯氏定氮法已经可以自动化进行 一些催化剂 如氧化汞或硫酸铜 也被使用来提高反应速率 转换因子 编辑转换因子是通过凯氏定氮法测得的氮换算为蛋白质的系数 理想状态下的蛋白质中的氮含量约为16 所以测量值乘以6 25即为蛋白质量 下表为总结出的转换因子数值 样本 转换因子乳制品 6 38面粉 5 70玉米 高粱 6 24花生 5 46大米 5 95大豆 5 71肉 6 25大麦 小米 燕麦 裸麦 5 83芝麻 向日葵 5 30应用 编辑凯氏定氮法的普遍适用性 精确性和可重复性已经得到了国际的广泛认可 它已经被确定为检测食品中蛋白质含量的标准方法 但是 这种方法并不能给出真实的蛋白质含量 因为所测定的氮可能不仅仅是由蛋白质转化来的 这可以从2007年美国宠物食品污染事件和2008年中国毒奶粉事件等食品安全事件中被体现 三聚氰胺 一种含氮量较高的物质 被添加到了食品中以伪造较高的含氮量 另外 由于不同的氨基酸序列 这种方法也需要许多不同的校正因子 而且 凯氏定氮法还需要使用浓硫酸和较长时间的加热 一般来讲 大于1小时 这也造成了在粗略测量蛋白质含量时 杜马法 英语 Dumas method 有时更方便些 2 参见 编辑总凯氮量参考资料 编辑 Practical Organic Chemistry 有機化學實驗 Julius B Cohen Dr D Julian McClements Analysis of Proteins University of Massachusetts 2007 04 27 原始内容存档于2007 04 26 外部链接 编辑凯氏定氮法仪器信息1 页面存档备份 存于互联网档案馆 凯氏定氮法仪器信息2 凯氏定氮法仪器信息3 凯氏定氮法仪器信息4 凯氏定氮法仪器信息5 凯氏定氮法仪器信息6 取自 https zh wikipedia org w index php title 凯氏定氮法 amp oldid 78985556, 维基百科，wiki，书籍，书籍，图书馆，
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