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LB培养基

LB培养基Lysogeny broth,LB),是微生物學實驗中最常用的營養性培養基,用於培養大腸桿菌細菌,分為液態培养基和加入瓊脂製成的固態培養基。加入抗生素的 LB 培養基可用於篩選以大腸杆菌爲宿主的選殖

一瓶LB液體培養基和一塊含有瓊脂的LB固體培養平板

名稱 编辑

儘管該培養基的名稱被廣泛解釋爲Luria-Bertani 培養基,然而根據其發明人貝爾塔尼英语Giuseppe Bertani(Giuseppe Bertani)的說法,這個名字來源於英語的 lysogeny broth,即溶菌肉湯[1]

配方 编辑

LB 培養基的配方發表於1951年有關溶源性英语lysogeny的論文中。用於使志賀氏菌屬的細菌增長[1][2]

LB培養基在1950年代曾被用作培養大腸桿菌的業界標準配方[3][4][5][6][7]。它還被廣泛應用於分子微生物學以及質體DNA的製備上,是重組大腸桿菌DNA時最常用的培養基[8]。但LB培養基不鼓勵應用於生理學研究上[9]


每個LB培養基的配方不盡相同,但大概都會包含下列幾項:

一升水中加入:

  • 胰蛋白腖(Tryptone)10
  • 酵母粉(Yeast extract)5克
  • 氯化鈉10克
  • 維生素(包含維生素B群)
  • 微量元素(包含等等)
  • 礦物質

1951年的原始論文中,貝爾塔尼在1公升的水中加入了10克的氯化鈉、1克的葡萄糖[6],但之後便剔除掉了葡萄糖。


氯化鈉的量經常隨細菌的生長需求不同而有所改變,像鹽分較低的Lennox和Luria培養基就適用於對於鹽分較敏感的抗生素實驗上[10]

  • LB-Miller (10 g/L NaCl)
  • LB-Lennox (5 g/L NaCl)
  • LB-Luria (0.5 g/L NaCl)

製備方法 编辑

 
LB液體培養基

至1L并調pH值至7.0後高溫滅菌。如需要製成固態培養基,在調pH值後加入1.5%(质量体积比,即每升培养基中加入15克)的瓊脂再滅菌。

  • 將上述成分溶於800 ml的去離子水中。
  • 加入蒸餾水或去離子水至一公升。
  • 高壓釜以 121 °C 滅菌20分鐘。
  • 冷卻後即可使用

參見 编辑

參考文獻 编辑

  1. ^ 1.0 1.1 Giuseppe Bertani. Lysogeny at mid-twentieth century: P1, P2, and other experimental systems. Journal of Bacteriology. 2004-02, 186 (3): 595–600 [2019-02-13]. ISSN 0021-9193. PMC 321500 . PMID 14729683. doi:10.1128/JB.186.3.595-600.2004. (原始内容于2019-08-13). 
  2. ^ Bertani, G. (1951). Studies on lysogenesis. I. The mode of phage liberation by lysogenic Escherichia coli. J. Bacteriol. 62:293-300. PMID 14888646 PDF
  3. ^ Miller, J. H. (1972). Experiments in molecular genetics. Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, New York.
  4. ^ Luria, S. E., J. N. Adams, and R. C. Ting. (1960). Transduction of lactose-utilizing ability among strain of E. coli and S. dysenteriae and the properties of the transducing phage particles. Virology. 12:348-390. PMID 13764402
  5. ^ Lennox, E. S. (1955). Transduction of linked genetic characters of the host by bacteriophage P1. Virology. 1:190-206. PMID 13267987
  6. ^ 6.0 6.1 Luria, S. E., and J. W. Burrous. (1957). Hybridization between Escherichia coli and Shigella. J. Bacteriol. 74:461-476. PMID 13475269 PDF
  7. ^ Anderson, E. H. (1946). Growth requirement of virus-resistant mutants of Escherichia coli strain B. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 32:120-128. PMID 16588724
  8. ^ Sambrook, J., E. F. Fritsch, and T. Maniatis. (1989). Molecular cloning: a laboratory manual, 2nd edition. Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, New York.
  9. ^ Nikaido, H. (2009). The Limitations of LB Medium. Small things considered - The Microbe Blog. ASM. http://schaechter.asmblog.org/schaechter/2009/11/the-limitations-of-lb-medium.html (页面存档备份,存于互联网档案馆
  10. ^ Commonly used bacterial E.coli growth media. Expression Technologies Inc.  http://www.exptec.com/Reagents/Common%20Media.htm (页面存档备份,存于互联网档案馆

lb培养基, lysogeny, broth, 是微生物學實驗中最常用的營養性培養基, 用於培養大腸桿菌等細菌, 分為液態培养基和加入瓊脂製成的固態培養基, 加入抗生素的, 培養基可用於篩選以大腸杆菌爲宿主的選殖, 一瓶lb液體培養基和一塊含有瓊脂的lb固體培養平板, 目录, 名稱, 配方, 製備方法, 參見, 參考文獻名稱, 编辑儘管該培養基的名稱被廣泛解釋爲luria, bertani, 培養基, 然而根據其發明人貝爾塔尼, 英语, giuseppe, bertani, giuseppe, bertani, 的. LB培养基 Lysogeny broth LB 是微生物學實驗中最常用的營養性培養基 用於培養大腸桿菌等細菌 分為液態培养基和加入瓊脂製成的固態培養基 加入抗生素的 LB 培養基可用於篩選以大腸杆菌爲宿主的選殖 一瓶LB液體培養基和一塊含有瓊脂的LB固體培養平板 目录 1 名稱 2 配方 3 製備方法 4 參見 5 參考文獻名稱 编辑儘管該培養基的名稱被廣泛解釋爲Luria Bertani 培養基 然而根據其發明人貝爾塔尼 英语 Giuseppe Bertani Giuseppe Bertani 的說法 這個名字來源於英語的 lysogeny broth 即溶菌肉湯 1 配方 编辑LB 培養基的配方發表於1951年有關溶源性 英语 lysogeny 的論文中 用於使志賀氏菌屬的細菌增長 1 2 LB培養基在1950年代曾被用作培養大腸桿菌的業界標準配方 3 4 5 6 7 它還被廣泛應用於分子微生物學以及質體DNA的製備上 是重組大腸桿菌DNA時最常用的培養基 8 但LB培養基不鼓勵應用於生理學研究上 9 每個LB培養基的配方不盡相同 但大概都會包含下列幾項 一升水中加入 胰蛋白腖 Tryptone 10克 酵母粉 Yeast extract 5克 氯化鈉10克 維生素 包含維生素B群 微量元素 包含氮 硫 鎂等等 礦物質1951年的原始論文中 貝爾塔尼在1公升的水中加入了10克的氯化鈉 1克的葡萄糖 6 但之後便剔除掉了葡萄糖 氯化鈉的量經常隨細菌的生長需求不同而有所改變 像鹽分較低的Lennox和Luria培養基就適用於對於鹽分較敏感的抗生素實驗上 10 LB Miller 10 g L NaCl LB Lennox 5 g L NaCl LB Luria 0 5 g L NaCl 製備方法 编辑 nbsp LB液體培養基加水至1L并調pH值至7 0後高溫滅菌 如需要製成固態培養基 在調pH值後加入1 5 质量体积比 即每升培养基中加入15克 的瓊脂再滅菌 將上述成分溶於800 ml的去離子水中 加入蒸餾水或去離子水至一公升 用高壓釜以 121 C 滅菌20分鐘 冷卻後即可使用參見 编辑大腸桿菌 瓊脂平板 薩爾瓦多 盧瑞亞參考文獻 编辑 1 0 1 1 Giuseppe Bertani Lysogeny at mid twentieth century P1 P2 and other experimental systems Journal of Bacteriology 2004 02 186 3 595 600 2019 02 13 ISSN 0021 9193 PMC 321500 nbsp PMID 14729683 doi 10 1128 JB 186 3 595 600 2004 原始内容存档于2019 08 13 Bertani G 1951 Studies on lysogenesis I The mode of phage liberation by lysogenic Escherichia coli J Bacteriol 62 293 300 PMID 14888646 PDF Miller J H 1972 Experiments in molecular genetics Cold Spring Harbor Laboratory Cold Spring Harbor New York Luria S E J N Adams and R C Ting 1960 Transduction of lactose utilizing ability among strain of E coli and S dysenteriae and the properties of the transducing phage particles Virology 12 348 390 PMID 13764402 Lennox E S 1955 Transduction of linked genetic characters of the host by bacteriophage P1 Virology 1 190 206 PMID 13267987 6 0 6 1 Luria S E and J W Burrous 1957 Hybridization between Escherichia coli and Shigella J Bacteriol 74 461 476 PMID 13475269 PDF Anderson E H 1946 Growth requirement of virus resistant mutants of Escherichia coli strain B Proc Natl Acad Sci USA 32 120 128 PMID 16588724 Sambrook J E F Fritsch and T Maniatis 1989 Molecular cloning a laboratory manual 2nd edition Cold Spring Harbor Laboratory Cold Spring Harbor New York Nikaido H 2009 The Limitations of LB Medium Small things considered The Microbe Blog ASM http schaechter asmblog org schaechter 2009 11 the limitations of lb medium html 页面存档备份 存于互联网档案馆 Commonly used bacterial E coli growth media Expression Technologies Inc http www exptec com Reagents Common 20Media htm 页面存档备份 存于互联网档案馆 取自 https zh wikipedia org w index php title LB培养基 amp oldid 80037443, 维基百科,wiki,书籍,书籍,图书馆,

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